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诊断低血糖症除详细的病史及测定血糖外，还必须具备Whipple三项标准：①发病多在禁食或用力的情况下;②注射葡萄糖或口服糖水后临床症状可迅速缓解;③发作时在成人及儿童血糖低于3.0mmol/L。
一、低血糖症的诊断依据 根据病史、临床症状和实验室检查资料可以诊断。 应确定为器质性或功能性低血糖及其病因，临床上最常见的低血糖顺序为功能性，胰岛素瘤， 早期轻症糖尿病，器质性者多为空腹低血糖，发作时间较长大多>30min，且多呈顽固性，进行性， 罕见自愈，功能性者多有植物神经不稳定的症状，餐后1-4h发作，每次发作<30min，呈间歇性，非进行性，可自愈。
二、低血糖症的检查 1.检验 测空腹及发作时血糖，血胰岛素、C肽水平，计算胰岛素释放指数空腹血胰岛素/空腹血糖，必要时做饥饿试验禁食12～72h是否诱发低血糖和胰岛素释放抑制试验静滴R10.1U/kg?h，比较注射前后血清C肽水平。 2.腹腔B超检查 必要时作。 3.X线检查 怀疑胰岛素瘤的患者，可做腹部CT，特别是胰腺CT，门静脉及脾静脉导管取血测定胰岛素，选择性胰动脉造影。
三、低血糖症的鉴别 应确定为器质性或功能性低血糖及其病因，临床上最常见的低血糖顺序为功能性、胰岛素瘤、 早期轻症糖尿病。器质性者多为空腹低血糖，发作时间较长大多>30min，且多呈顽固性、进行性、 罕见自愈。功能性者多有植物神经不稳定的症状，餐后1-4h发作，每次发作<30min，呈间歇性、非进行性，可自愈。
1. 对发作性特别在空腹精神-神经异常、惊厥、行为异常、意识障碍或昏迷者，尤其是对用胰岛素或口服降糖药治疗的糖尿病患者，应考虑到低血糖症的可能，及时查验血糖。值得注意的是，有些低血糖病人在就诊时血糖正常，并无低血糖症状，往往仅表现为慢性低血糖的后遗症，如偏瘫、痴呆、癫痫、精神失常、儿童智商明显低下等。 以致临床常误诊为精神病、癫痫或其他器质性脑病如脑炎等。因此，应与其他中枢神经系统器质性病变的疾病相鉴别，如脑炎、多发性硬化、脑血管意外、癫痫、糖尿病酮症酸中毒昏迷、糖尿病非酮症高渗性昏迷、精神病、药物中毒等。
2.空腹、餐后数小时或体力活动后出现交感神经兴奋为主要表现的低血糖症，应与具有交感神经兴奋表现的疾病，如甲状腺功能亢进症、嗜铬细胞瘤、自主神经功能紊乱、糖尿病自主神经病变、更年期综合征等相鉴别。
3.酗酒后出现的低血糖症应与酒醉相鉴别乙醇不仅可引起低血糖，也可引起酮症，有时乙醇引起的低血糖及酮症可被误认为糖尿病酮症酸中毒，这是诊断时需注意的。
